生化培養(yǎng)箱廣泛應用于許多領域。 Zui常用的兩種方法是多管發(fā)酵法和膜過濾法。 下面我們介紹這兩個應用程序中的預防措施。
1,培養(yǎng)溫度要求大腸菌群中的細菌不僅生活在腸道中,而且在自然環(huán)境中也常存在于水和土壤中,但是對于生活在自然環(huán)境中的大腸菌群的培養(yǎng)是合適的溫度 大約25℃,如果在37℃下培養(yǎng)仍可以生長,但是如果將生化培養(yǎng)箱的培養(yǎng)溫度提高到44.5℃,它將不再生長,直接使用糞便中的大腸菌 到約37℃生長,如將生化培養(yǎng)箱的溫度升高至44.5℃仍可繼續(xù)生長。 因此,生化培養(yǎng)箱中高培養(yǎng)溫度的方法可用于區(qū)分自然環(huán)境中的大腸菌和糞便中的大腸菌。 兩種方法都基于此原理。 將已接種的樣品或裝有過濾器的培養(yǎng)基放入生化培養(yǎng)箱中時,生化培養(yǎng)箱中的溫度必須達到要求的溫度(44.5±0.5℃),然后才能放置。 如果使用恒溫水浴,則水面應高于接種物表面,帶有濾膜的培養(yǎng)皿應沉到水浴底部。
2.氯化水樣品的處理通過氯處理滅菌的水樣中含有一定量的殘留氯,這會使大腸菌群處于破壞或抑制狀態(tài)。 采集水樣時,應事先在生化培養(yǎng)箱中取樣,中間加硫代硫酸鈉,對硫代硫酸鈉進行脫氯處理,以使被破壞的細菌得以回收和修復,從而避免了計數(shù)結果偏低的現(xiàn)象。 甚至是假陰性。 此外,殘留氯對通過過濾法培養(yǎng)的細菌具有特別明顯的抑制作用,因此在抽濾過程中應在水樣中稀釋大量無菌水以減少殘留氯的殘留。
3.樣品的保存在使用前,應將用于生化培養(yǎng)箱采樣的容器加蓋。 用牛皮紙包裹瓶蓋和瓶口。 將其置于160℃-170℃的干燥箱中2小時,或用高壓蒸汽滅菌。將真菌在121℃下滅菌15分鐘。 采樣后正確保存水樣也很重要。 保存不當會導致樣品中的大腸菌在某些條件下死亡或重新生長,從而影響測試結果的準確性。 將水樣送入測試室后,應立即進行測試。 如果由于某種原因無法檢測到,應將樣品放入冰箱(2℃-10℃)中,并在2小時內進行測試。
4.培養(yǎng)基的準備和保存
(1)將多管發(fā)酵法中使用的培養(yǎng)液分成各生化培養(yǎng)箱的發(fā)酵管后,應盡快將其放入高壓蒸汽滅菌器中,并在115°C下滅菌。 20分鐘(注意:此溫度也應控制良好,不僅可以實現(xiàn)滅菌,還可以防止培養(yǎng)物分解和損失),然后存放在冰箱或黑暗的地方以備將來使用。
⑵。 濾膜法中使用的m-fc介質主要使用購買的產(chǎn)品。 培養(yǎng)基中苯胺藍的純度和質量通常會影響菌落的顏色。 因此,無菌包裝的培養(yǎng)基在使用前要進行接種。 典型的糞大腸菌群細菌,觀察對比菌落的顏色,以鑒定其穩(wěn)定性。
5.結果統(tǒng)計
⑴。 多管發(fā)酵法的結果是根據(jù)不同接種量的發(fā)酵管中陽性結果的數(shù)量從mpn表中找到相應的mpn指數(shù),以計算每升水中糞便大腸菌群的mpn值。 mpn是“最可能的數(shù)字”的縮寫,指的是最可能的數(shù)字。 這是一種根據(jù)統(tǒng)計理論估算水中細菌總數(shù)和衛(wèi)生質量的方法。 非常重要,否則會導致較大的偏差。
⑵。 過濾方法的結果是對過濾器上的藍色或藍綠色菌落進行計數(shù),以計算每升水中糞便大腸菌的數(shù)量。 因此,為了便于計數(shù)并減少錯誤,理想的水樣體積為在濾膜上生長的20-60個糞大腸菌落。
生化培養(yǎng)箱中通常使用多管發(fā)酵和膜過濾方法。 掌握這些預防措施可以使我們減少使用過程中錯誤的發(fā)生。