上海鰲珍生化培養(yǎng)箱在多管發(fā)酵法與濾膜法應(yīng)用中的注意事項(xiàng)

生化培育箱普遍運(yùn)用于多個(gè)范疇，其間zui常運(yùn)用的兩種方法是多管發(fā)酵法與濾膜法，下面我們引見一下在這兩種運(yùn)用中有哪些留意事項(xiàng)。

1.培育溫度的請求 總大腸菌群中的細(xì)菌除日子在腸道中外，在自然環(huán)境中的水與土壤中也經(jīng)常存在，但此等在自然環(huán)境中日子的大腸菌群培育的zui適合溫度為25℃左右，如在37℃培育則仍可生長，但如將生化培育箱培育溫度再升高至44.5℃，則不再生長，而直接來自糞便的大腸菌群細(xì)菌，習(xí)氣于37℃左右生長，如將生化培育箱培育溫度升高至44.5℃仍可繼續(xù)生長。因而，可用提生化培育箱高培育溫度的方法將自然環(huán)境中的大腸菌群與糞便中的大腸菌群區(qū)別，兩種方法也都基于此理。將接種好的樣品或裝有濾膜的培育基放入生化培育箱時(shí)，生化培育箱箱內(nèi)溫度一定要抵達(dá)所請求的溫度(44.5±0.5℃)時(shí)，方可放入。如用恒溫水浴箱時(shí)，其水面要高于接種物面，放濾膜的培育皿要沉到水浴箱底部。

2.加氯水樣的處置 經(jīng)氯處置消毒過的水樣，水中含有一定量的余氯，使大腸菌群處于受損或受抑止?fàn)顟B(tài)，在采集水樣時(shí)應(yīng)提早在生化培育箱采樣瓶中加硫代硫酸鈉，硫代硫酸鈉可以脫氯，使受損的細(xì)菌得以復(fù)蘇與修復(fù)，然后防止呈現(xiàn)計(jì)數(shù)成果偏低乃至假陰性的現(xiàn)象。此外余氯對濾膜法培育的細(xì)菌其抑止效果尤為明顯，所以抽濾時(shí)應(yīng)對水樣停止很多無菌水稀釋，以削減余氯的殘留。

3.樣品的保管生化培育箱采樣用的容器運(yùn)用前應(yīng)蓋好瓶蓋，用牛皮紙將瓶蓋和瓶頸處包裹好，置枯燥箱160℃-170℃干熱滅菌2h，或用高壓蒸汽滅菌器121℃滅菌15min。采樣后水樣的正確保管也很重要，如保管不當(dāng)可使樣品中的大腸菌群細(xì)菌逝世或在一定條件下再生長，這些都將影響檢測成果的準(zhǔn)確性。檢測室接到水樣后，應(yīng)立刻檢測，如因故不能檢測時(shí)，應(yīng)立刻將樣品置于冰箱內(nèi)(2℃-10℃)并于2小時(shí)內(nèi)檢測。

4.培育物質(zhì)的制備與保管

⑴.多管發(fā)酵法所運(yùn)用的培育液在分裝于各生化培育箱發(fā)酵管中后，應(yīng)將發(fā)酵管趕快放于高壓蒸汽滅菌器中，在115℃滅菌20min(留意：這個(gè)溫度也應(yīng)操控好，既抵達(dá)滅菌的效果，還要避免培育物質(zhì)分化喪失)，然后貯存于冰箱或暗處備用。

⑵.濾膜法所采用的m-fc培育基多運(yùn)用外購的廢品，培育基中苯胺藍(lán)的純度和質(zhì)量常常影響菌落的顏色，因而，無菌包裝的成套培育基在運(yùn)用前，先接種典型糞大腸菌，以調(diào)查比照菌落的顏色，來審定其穩(wěn)定性。

5.成果計(jì)算

⑴.多管發(fā)酵法的成果是依據(jù)不同接種量的發(fā)酵管所呈現(xiàn)陽性成果的數(shù)目，從mpn表中查得相應(yīng)的mpn指數(shù)，來核算每升水中糞大腸菌群細(xì)菌的mpn值。mpn是“most probable number”的縮寫，指zui大可能數(shù)，它是依據(jù)計(jì)算學(xué)理論，估量水體中的菌群密度和衛(wèi)生質(zhì)量的一種方法，所以準(zhǔn)確判別不同接種量發(fā)酵管的陽性數(shù)是十分重要的，否則將招致較大偏向。

⑵.濾膜法的成果是計(jì)數(shù)濾膜上呈藍(lán)或藍(lán)綠色的菌落，來核算出每升水樣中的糞大腸菌群數(shù)。所以為便于計(jì)數(shù)，削減誤差，志向的水樣體積是一片濾膜上生長20-60個(gè)糞大腸菌群菌落。

多管發(fā)酵法與濾膜法是生化培育箱在運(yùn)用中zui常用到的，把握這些留意事項(xiàng)可以讓我們在運(yùn)用中削減過錯(cuò)的發(fā)作。